骨关节炎和关节软骨
目的
检测原发性骨关节炎软骨细胞中MAPK-APK2在其介导的对前炎性因子的细胞反应中的作用
方法
通过腺病毒感染，显性负相MK2的传递在Hela细胞中完成。细胞热休克蛋白活性由Bioplex检测。原发性骨关节炎软骨细胞因被关节软骨的胶原酶分解而变得孤立。磷酸化MK2可以通过蛋白印迹法和免疫组织法检测。含siRNA初级软骨细胞的转染可通过阳离子酯和实时PCR的基因表达实现。PGE2和MMPs的产生通过酶联免疫吸附试验来定量。
结果
显性负相MK2的过度表达抑制HSP-27磷酸化，并大大降低了24小时内由IL - 1β和TNF - α共同倡导的Hela细胞中PGE2的释放。磷酸化的MK2存在于骨关节炎关节软骨和由IL - 1β诱导的孤立的初级骨关节炎软骨细胞中。含MK2siRNA反义序列的OA软骨细胞转染明显降低PGE2的基础和由IL - 1β 诱发的释放。siRNA介导的MK2基因抑制同样显著降低MMP13的基本以及经IL-1β 诱发的表达，降低MMP13和MMP3蛋白的释放但对MMP1没有影响。
结论
实验数据表明，MK2在骨关节炎关节软骨和孤立的初级软骨细胞中是有活性的，它介导PGE2， MMP3 和 MMP13的释放。通过介导p38活化对PGE2释放的下游效应以及分解蛋白酶的表达和释放，MK2在OA感觉过敏和关节结构的退行性变中起重要作用，这些发现对于了解MK2上述作用有提示意义。
